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近年来,荧光成像技术因其可以高效无损的对目标基团及生物结构进行成像分析,已经在生物医学和环境监测等诸多领域发挥着重要作用。双光子荧光成像技术采用近红外光激发,更大程度上降低了生物的光损伤性,并且对生物组织具有更深的穿透能力,因此可以实现生物组织成像。荧光分子探针是荧光成像技术的核心,将双光子成像技术与荧光监测技术相结合,设计合成具有优良双光子性能的荧光探针尤为重要。目前,由于受到双光子吸收截面及水溶性等因素的限制,能够应用于双光子荧光成像的荧光探针依然匮乏,因此,我们以水溶性较好的硅基罗丹明荧光染料为发光中心,分别在其9位苯环上引入甲基、三氟甲基、甲氧基和两个甲氧基合成了硅基罗丹明荧光探针SiR-C、SiR-F、SiR-O和SiR-DO,并对几例探针的光物理性能和双光子生物荧光成像性能进行了探究。研究表明,在PBS溶液,四例荧光探针均具有较好的溶解性。甲氧基的引入,赋予探针SiR-O和SiR-DO较高的荧光量子产率和较好的光稳定性。其中,双甲氧基的引入使探针SiR-DO具有更好的化学稳定性。我们对两例荧光量子产率较高的荧光探针进行了一系列生物荧光成像实验探究,细胞毒性实验表明,两例探针孵育24h后的Hela细胞存活率均大于85%,表现出良好的生物相容性,在浓度为500 nM时,两例探针仅需1 min就能进入细胞,表现出很好的透膜性。两例探针与线粒体绿的定位系数均大于88%,表明具有良好的线粒体定位能力。双光子吸收截面探究实验表明,甲氧基的引入,使探针SiR-O和SiR-DO具有较大的双光子吸收截面。探针浓度为500 nM时,两例荧光探针能迅速通过细胞膜进入神经细胞内,显现出良好的细胞膜通透性。在神经细胞内,探针SiR-O和SiR-DO与线粒体绿的定位系数均大于90%,表明在神经细胞内具有优异的线粒体定位能力。神经细胞内双光子激光照射10 min,探针SiR-O和SiR-DO的荧光强度基本不变,表明具有优良的荧光稳定性。两例探针在小鼠脑组织内的荧光穿透厚度分别为70μm和100μm,表现出较强的组织成像性能。表明两例探针具有优良的光学性能和双光子荧光成像性能,可以作为双光子荧光成像工具应用于生物成像领域。
SiR-alkyne 硅基罗丹明-炔基
SiR-azide 硅基罗丹明-叠氮
SiR-BCN 硅基罗丹明-环丙烷环辛炔
SiR-COOH 硅基罗丹明-羧基SiR-Maleimide 硅基罗丹明-马来酰亚胺SiR-NHS ester 硅基罗丹明-琥珀酰亚胺酯SiR-tetrazine 硅基罗丹明-四嗪SiR-Me-tetrazine 硅罗丹明-四嗪荧光探针SiR-DBCO 硅基罗丹明-二苯基环辛炔SiR650-BG 硅基罗丹明-苄基鸟嘌呤
运输说明：
极低温产品：极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来，再用泡沫盒密封，胶带层层粘住泡沫盒，放入德尔塔生物的箱子，然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
低温产品：低温产品运输过程中加装冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来，再使用泡沫盒密封，用胶带严实密封泡沫盒，再放入德尔塔生物的箱子（保温效果最少可以持续一周），然后交付给合作快递，安全快速高效放心的送至客户的手中，保证产品的性质稳定如一，为您的实验保驾护航。
常温产品：常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货，准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。
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