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酞菁(Phthalocyanine,Pc)作为第二代光敏剂的应用前景已受到广泛关注。但由于酞菁大环共轭体系的强疏水作用,多数酞菁化合物水溶性较低,不利于其实际应用。
藻蓝蛋白(Phycocyanin,PC)是一种具有良好水溶性的卟啉类色素蛋白,已有研究表明,藻蓝蛋白具有光敏活性,作用光谱处于550nm-650nm,但光敏活性有待进一步提高。
血清白蛋白优选为人血清白蛋白或牛血清白蛋白。 其中, 人血清白蛋白优选为重组人血清白蛋白。 牛血清白蛋白（BSA），是牛血清中的一种球蛋白。
一、藻蓝蛋白—酞菁复合物的描述
利用酞菁与藻蓝蛋白的各自优势,进而构建具有双功能基的复合光敏剂,围绕藻蓝蛋白与酞菁复合物的制备、光谱性质、光动力活性开展研究,主要研究内容和结果总结如下:
1.藻蓝蛋白的提取与纯化本文选择藻胆蛋白含量较高的螺旋藻作为提取原料。先采用反复冻融法从螺旋藻中得到藻蓝蛋白粗提液,再将粗提液经过(NH4)2S04盐析进行初步的提纯。盐析后的藻蓝蛋白通过DEAE Sepharose Fast Flow离子交换层析法和葡聚糖凝胶层析法进一步纯化。电泳和光谱测试表明所获得的藻蓝蛋白具有较高纯度,光谱纯度达到4.0以上,分子量为115kDa左右。
2.酞菁的合成与表征合成和表征了三种酞菁,分别是1-[4-(2-氨基乙基)苯氧基]酞菁锌(简称ZnPcNH2),1,8(11),15(18),22(25)-四(3-羧基苯氧基)酞菁锌(简称(4),1-[4-(2-羧基乙基)苯氧基]酞菁锌(简称E1)。文献检索表明,ZnPcNH2酞菁配合物及其前驱体尚未见报道。
3.藻蓝蛋白-酞菁复合物的制备本文通过非共价结合与共价结合两种方式来构建藻蓝蛋白-酞菁复合物。对于非共价结合途径,首先通过光谱法研究了一系列酞菁与藻蓝蛋白的相互作用。进而,选取了六种酞菁,通过温育交换法制备了六种非共价结合复合物。对于共价结合途径,选取了两种氨基衍生物及两种羧基衍生物修饰的酞菁锌,采用戊二醛连接法以及成酰胺反应,获得了四种共价复合物。同时,通过光谱法对复合物的组成进行了分析。
4.藻蓝蛋白-酞菁复合物的性质研究研究了复合物在水溶液中电子吸收光谱、荧光光谱和存在状态。评价了部分酞菁-藻蓝蛋白复合物对人体肝癌细胞HepG2的光动力抑制活性。结果表明,无取代酞菁锌与藻蓝蛋白的复合物(ZnPc-PC,结合比为8:1)光动力抑制HepG2的IC50值为2.1μM,四羧基酞菁锌和藻蓝蛋白(C4-PC,结合比为6:1)光动力抑制HepG2的IC50值为0.93μM,上述两种复合物不但显示了显著的光动力抗癌活性,且活性明显高于藻蓝蛋白和相应的酞菁锌,值得对其深入开展研究。
二、血清白蛋白-酞菁复合物的描述
一种酞菁-血清白蛋白复合物的原料包括酞菁锌配合物和血清白蛋白，其中酞菁锌配3合物与血清白蛋白的物质量浓度比在1-2之间。所述酞菁锌配合物包括α - (8-喹啉氧基)单取代酞菁锌、α-(8-(4,6-二甲基-2-嘧啶氧基)_3，6-二氧杂-1-辛氧基)酞菁锌、β - (8- (4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)_3， 6-二氧杂-1-辛氧基)酞菁锌、双α-(8-(4，6-二甲基-2-嘧啶氧基)-3，6-二氧杂-1-辛氧基)酞菁锌、α-喹啉-低聚乙二醇酞菁锌和β-喹啉-低聚乙二醇酞菁锌和二-α-喹啉-低聚乙二醇酞菁锌。所述血清白蛋白包括人血清白蛋白、动物血清白蛋白和重组血清白蛋白。所述制备方法包括以下步骤先将血清白蛋白进行脱脂肪酸预处理，所得预处理后的脱脂血清白蛋白于冻干机中冻干，所得冻干粉用水溶解，形成白蛋白水溶液，再将干燥的酞菁锌配合物制成DMF储备液，在25-37°C搅拌条件下，将酞菁锌配合物的DMF溶液逐滴滴加到脱脂后的白蛋白水溶液中，形成混合溶液，滴加完毕后搅拌M小时，之后将反应液离心，取上清液于冻干机中冻干，冻干后的固体用去离子水溶解，离心，取上清液，再次冻干，直至所得固体完全复溶于水，即得所述的酞菁-血清白蛋白复合物。 
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