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2022-12-22 23:07:48

FITC标记小鼠抗人CD14/黄曲霉毒素B1/AFB1抗体的过程

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FITC标记小鼠抗人CD14/黄曲霉毒素B1/AFB1抗体的材料和方法及步骤如下:
1、材料:
抗体溶液、0.5mol/L pH9.0碳酸盐缓冲液、无菌生理盐水、异硫氰酸荧光素、1%硫柳汞水溶液、三角烧瓶(25~50mL)、冰及冰槽(或1000mL烧杯)、电磁搅拌器、灭菌吸管、透吸袋、玻棒、棉线及烧杯(500mL)、pH7.2或pH8.0的0.01mol/L PBS等。
2、操作过程:
a.抗体的准备:取适量已知抗体浓度的溶液,置入三角烧瓶中,加入生理盐水及碳酸盐缓冲液,使最后抗体浓度为20mg/mL,缓冲液容量为总量的1/10,混匀,将三角烧瓶置冰槽中,电磁搅拌(速度适当以不起泡沫为宜)5~10min。
b.荧光素的准备:根据欲标记的蛋白总量,按每毫克蛋白加0.01mg荧光素,用分析天平准确称取所需的异硫氰酸荧光素粉末。
c.标记:边搅拌边将称取的荧光色素渐渐加入抗体溶液中,避免将荧光素粘于三角瓶壁或搅拌玻璃棒上(大约5~10min内加完)。加毕后,继续搅拌12~18h。标记期间应保持蛋白溶液于4摄氏度冰箱或冰库中。
d.透析:标记完毕后,将标记的抗体溶液离心(2500rpm)20min,除去其中少量的沉淀物,装入透吸袋中后再置于烧杯中,用pH8.0缓冲盐水透析(0~4摄氏度)过液。
e.过柱:取透析过液的标记物,过Focudex G-25或者Focudex G-50进行系体置换,然后分装、贮存于4摄氏度冰箱或冰库中。
定制FITC标记抗体主要有以下抗体:
小鼠抗曲霉菌单克隆抗体
小鼠抗雌二醇单克隆抗体
小鼠抗GH单克隆抗体
小鼠抗FSH单克隆抗体
小鼠抗β-HCG单克隆抗体
小鼠抗游离β-HCG单克隆抗体
肠毒素E单克隆抗体
肠毒素D单克隆抗体
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肠毒素A单克隆抗体
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壬基酚单克隆抗体
多溴联苯醚单克隆抗体
四溴双酚A单克隆抗体
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运输说明:
极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入德尔塔生物的箱子,然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入德尔塔生物的箱子(保温效果最少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速高效放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速高效的快递保证产品快速送达您的手中。
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