NHS-biotin，也被称为生物素琥珀酰亚胺酯，是一种经典的生物素标记试剂。它通过一个琥珀酰亚胺酯基团与生物分子中的伯胺基（如蛋白质或多肽的氨基）反应，形成稳定的酰胺键，从而将生物素引入到生物分子中。NHS-biotin在适当的溶剂（如DMSO）中溶解后，可以加入到蛋白质或其他生物分子溶液中，在室温下进行标记反应。反应完成后，通过透析、凝胶过滤等方法去除未反应的NHS-biotin，即可得到生物素化的蛋白质或生物分子。

NHS-biotin具有广泛的应用，包括蛋白质标记、亲和纯化、细胞成像等。它特别适用于对活细胞内部或表面的融合蛋白进行生物素化，从而方便地进行后续的荧光成像、流式细胞术等分析。

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